Више опсега у пцр -у

Један од вероватних узрока више трака у ПЦР -у је неспецифично пражњење прајмера. ... Превише ПЦР циклуса (више од 30) такође има потенцијал да изазове више опсега због повећане шансе грешке са сваким циклусом. Загађење ДНК је још један могући фактор.

1. Зашто постоји више трака у електрофорези са гелом?
2. Како решавате проблеме са више опсега у ПЦР -у?
3. Шта су ПЦР траке?
4. Зашто постоји више опсега у РАПД -у?

Зашто постоји више трака у електрофорези са гелом?

Матрица гела делује као сито: мањи молекули ДНК мигрирају брже од већих, па се молекули ДНК различитих величина раздвајају у различите траке током електрофорезе.

Како решавате проблеме са више опсега у ПЦР -у?

Популарни одговори (1)

1. урадите реакцију са негативном контролом (без шаблона). ...
2. Повећајте температуру жарења. ...
3. Редизајнирајте прајмере и учините 3 ′ дужим. ...
4. Повећајте време жарења ако су неспецифични производи краћи од вашег циља. ...
5. Користите мање шаблона ДНК.
6. Покушајте додирну ПЦР.

Шта су ПЦР траке?

Слаба горња трака (298 бп) идентификује ПЦР производ амплификован из једне мете у геному. Светлији доњи опсег (238 бп) идентификује вишециљни ПЦР производ са 10 копија понављања у истом геному. Оба ова циљна региона садрже 100% идентична места везивања за прајмере.

Зашто постоји више опсега у РАПД -у?

С обзиром да се РАПД-и генеришу насумичним жарењем помоћу прајмера од 10 нуклеотида, могло се очекивати да ће након сваког кориштеног прајмера постојати одређени број фрагмената. ... У зависности од тога шта упоређујете (мање или више генетски повезано), број полиморфних трака ће варирати.